Dienstleistungen zur Analyse posttranslationaler Proteinmodifikationen

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Die Auswirkungen posttranslationaler Modifikationen beherrschen

Die posttranslationalen Proteinmodifikationen stellen eine wesentliche Quelle für die Heterogenität von rekombinanten Proteinen, monoklonalen Antikörpern und anderen biotherapeutischen Produkten dar. Glykosylierung, Oxidation, Desamidierung, Glykierung, Spaltungen oder Variationen von Disulfidbrücken können die Struktur, die biologische Aktivität, die Stabilität, die Sicherheit und die Reproduzierbarkeit eines Produkts beeinflussen. Ihre Überwachung ist daher während der gesamten Entwicklung, bei Vergleichbarkeitsstudien, beim Technologietransfer, bei der Charakterisierung von Chargen und bei Untersuchungen von Abweichungen unerlässlich.

Modifikationen der Proteinsequenz kartieren

Je nach Sequenz, Expression und Lagerbedingungen kann das Labor Filab die Untersuchung auf Modifikationen wie die Oxidation empfindlicher Aminosäurereste, Desamidierung, Glykierung, Spaltungen, die Bildung oder Umlagerung von Disulfidbrücken, Ladungsvarianten und bestimmte Formen der Glykosylierung ausrichten. Die Peptidkartierung ermöglicht es, die auf Sequenzebene nachgewiesenen Modifikationen zu lokalisieren.

Chromatografie und Massenspektrometrie nutzen

Die Analysen können chromatografische Trennung, Elektrophorese, Messung der Molekülmasse und hochauflösende Massenspektrometrie kombinieren. LC-MS/MS-Ansätze, einschließlich der Peptidkartierung, liefern Informationen zur Identität der Peptide, zur Lokalisierung bestimmter Modifikationen und zum Vergleich ihrer relativen Häufigkeiten. Die Analyse des intakten Proteins ermöglicht es ergänzend, die globale Verteilung der molekularen Formen zu erfassen.

Verfahrensänderungen und Stabilitätsstudien absichern

Die Untersuchung posttranslationaler Modifikationen ist insbesondere bei einer Maßstabsänderung, einer Änderung des Kulturmediums, einer Weiterentwicklung der Aufreinigung, einem Wechsel des Produktionsstandorts oder einer Änderung der Formulierung sinnvoll. Sie ist auch hilfreich, um einen während der Stabilitätsprüfung beobachteten Trend, ein atypisches Ergebnis oder einen Unterschied zwischen Chargen zu untersuchen.

Eine auf Ihr Protein abgestimmte Analysestrategie

Das Labor Filab entwickelt Ansätze zur Proteinanalyse, die an Ihre Matrix, den Kenntnisstand über das Produkt und die zu unterstützende Entscheidung angepasst sind. Ziel ist es, kritische Qualitätsmerkmale zu identifizieren, Profile zwischen Chargen oder Stressbedingungen zu vergleichen und interpretierbare Ergebnisse für Ihre Teams aus Entwicklung, Produktion und Qualitätskontrolle bereitzustellen. Dieser Ansatz ergänzt die Dienstleistungen der Proteinanalyse.

Chargen und Herstellungsbedingungen vergleichen

Der Vergleich analytischer Profile liefert objektive Informationen zur Bewertung der Auswirkungen einer Änderung des Verfahrens, Lieferanten, der Formulierung, Verpackung oder Lagerbedingungen. So können insbesondere relative Veränderungen von Varianten oder das Auftreten neuer Spezies sichtbar gemacht und anschließend die erforderlichen ergänzenden Untersuchungen gezielt ausgerichtet werden.

Den Charakterisierungsumfang an den Bedarf anpassen

Eine explorative Studie kann eingerichtet werden, um die Suche nach einer Modifikation schnell auszurichten oder Proben zu vergleichen. Für weitergehende Anforderungen kann das Protokoll angepasst werden, um die Trennung, die Sequenzabdeckung, die Detektionsselektivität oder die Datenauswertung zu verbessern. Der Analyseplan wird vor Eingang der Proben gemeinsam mit Ihren technischen Ansprechpartnern festgelegt.

Entscheidungsrelevante Daten generieren

Im Labor Filab werden die Ergebnisse mit dem Ziel eines Vergleichs und zur Unterstützung von Entscheidungen aufbereitet. Die Analysedaten ermöglichen es, beobachtete Ähnlichkeiten und Unterschiede zwischen Proben zu dokumentieren, zu untersuchende Signale zu identifizieren und bei Bedarf ergänzende Analysen festzulegen. Für Rohstoffe oder Hilfsstoffe im Zusammenhang mit Ihren Formulierungen können Dienstleistungen wie die pharmazeutische ICP-Analyse zu Ihrer Charakterisierungsstrategie beitragen.

Ihre Studie mit dem Labor Filab definieren

Übermitteln Sie die verfügbaren Informationen zum Protein, zu den Proben, zur Formulierung, zu den erwarteten Vergleichen und zum Kontext der Studie. Geben Sie die vermuteten Modifikationen, frühere Ergebnisse und den gewünschten Zeitrahmen an. Stimmen Sie sich mit dem Labor Filab ab, um eine auf Ihren Bedarf abgestimmte Analysestrategie festzulegen, und erhalten Sie anschließend ein passendes Prüfprotokoll sowie ein entsprechendes Angebot.

Häufig gestellte Fragen

Wie lassen sich posttranslationale Modifikationen eines biotherapeutischen Proteins charakterisieren?

Die Charakterisierung beruht in der Regel auf einer Kombination aus Messungen der Masse des intakten Proteins, Peptidkartierung nach enzymatischem Verdau und massenspektrometrischer Analyse. Im Labor Filab wird die Strategie abhängig vom Protein, den gesuchten Modifikationen, der Matrix und dem Ziel der Studie festgelegt: Identifizierung, Vergleich, Überwachung von Verunreinigungen oder Untersuchung einer Qualitätsveränderung.

Welche posttranslationalen Modifikationen können bei einem Protein untersucht werden?

Welche Modifikationen untersucht werden, wird von Fall zu Fall festgelegt. Zu den am häufigsten untersuchten gehören Glykosylierung, Oxidation, Desamidierung, Glykierung, proteolytische Spaltungen, Ladungsvarianten und Modifikationen der Disulfidbrücken. Das Labor Filab wählt die relevanten analytischen Zielgrößen im Hinblick auf die Struktur Ihres Produkts und Ihre Qualitätsfragestellung aus.

Welche Techniken werden zur Analyse posttranslationaler Modifikationen eingesetzt?

Das Labor Filab setzt insbesondere Flüssigchromatografie gekoppelt mit Massenspektrometrie, Peptidkartierung und Massenanalyse des intakten Proteins ein. Die Techniken werden abhängig von der Art der Modifikation, der Komplexität der Matrix, der verfügbaren Menge und dem erwarteten Charakterisierungsumfang ausgewählt.

In welchen Fällen sollte eine Vergleichbarkeitsstudie posttranslationaler Modifikationen durchgeführt werden?

Eine Vergleichbarkeitsstudie wird empfohlen, sobald eine Änderung, die das Produktprofil beeinflussen könnte, in Betracht gezogen oder festgestellt wird. Sie kann Chargen aus unterschiedlichen Herstellungsverfahren, Proben, die Stabilitätsbelastungen ausgesetzt waren, Produkte vor und nach einem Produktionstransfer oder Chargen mit einem analytischen Unterschied betreffen.

Wie kann eine Analyseleistung zu posttranslationalen Modifikationen im Labor Filab gestartet werden?

Wenden Sie sich zum Start an das Labor Filab und übermitteln Sie eine Beschreibung Ihres Produkts, die Anzahl der Proben, deren Matrix, die Lagerbedingungen und das analytische Ziel. Diese Angaben ermöglichen es, eine Analysestrategie, die Voraussetzungen für den Versand und einen geeigneten Untersuchungsumfang vorzuschlagen.