ANALYSEMETHODE: ICH VALIDIERE!

Unabhängig von Ihrer Branche (Pharma, Werkstoffe, Medizinprodukte, Feinchemie, Kosmetik …) ist die Validierung einer Methode in der analytischen Chemie ein entscheidender Schritt.

Warum? Um die Zuverlässigkeit und Rückverfolgbarkeit der Ergebnisse einer Analyse auf einer bestimmten Matrix sicherzustellen.

Bei Filab kennen wir dieses Thema sehr gut!

Wenn wir beispielsweise eine Akkreditierung durch das COFRAC (Comité FRançais d’ACcréditation) für einen flexiblen Geltungsbereich beantragen, also für eine nicht standardisierte analytische Methode (oder außerhalb des Anwendungsbereichs einer Norm), müssen wir objektiv nachweisen, dass das eingesetzte Verfahren für die Probe geeignet ist. Und das in einem einwandfreien Qualitätsumfeld (Qualitätsmanagementsystem, Qualifizierung der Geräte und Befähigung des Personals).

Doch der ISO-17025-Kontext ist nicht die einzige Situation, in der unsere Spezialisten eine Analysemethode validieren müssen: Die Validierung einer analytischen Methode kann auch aufgrund von Anforderungen unserer Kunden, im Rahmen eines Lieferantenstreits oder in einem zunehmend strengeren industriellen regulatorischen Umfeld erforderlich sein.

QUELS SONT LES PARAMETRES EVALUES LORS D’UNE VALIDATION ANALYTIQUE ?

1. Die Spezifität (oder Selektivität)

La spécificité d’une méthode d’analyse est basée sur une absence d’interférences. La méthode d’analyse doit en effet permettre de quantifier l’analyte seul, c’est-à-dire sans qu’il n’y ait d’interférences liées à la matrice (impuretés, autres constituants…). Elle sera observée par comparaison de l’analyte avant et après dopage de la matrice.

2. Die Präzision

La fidélité représente l’étroitesse de l’accord entre les résultats d’essai indépendants, réalisés dans des conditions prédéfinies. Elle sera jugée au travers du calcul du Coefficient de Variation (CV).

• Wiederholbarkeit Nahezu unveränderte Betriebsbedingungen: gleicher Tag, gleicher Bediener, gleiches Gerät …
• Zwischenpräzision Variable Betriebsbedingungen – Mindestniveau: gleicher Tag, Bediener A / Bediener B, gleiches Gerät …
• Reproduzierbarkeit Variable Betriebsbedingungen – Höchstniveau: Tag A / Tag B, Bediener A / Bediener B, Gerät A / Gerät B … In der Regel Durchführung von Ringversuchen (EIL).

3. Die Richtigkeit

La justesse est l’étroitesse de l’accord entre la valeur moyenne obtenue à partir d’une large série de résultats d’essai et une valeur vraie (valeur de référence). Elle s’exprime généralement en termes de taux de recouvrement et de son intervalle de confiance.

4. Die Linearität

La linéarité d’une méthode d’analyse est la capacité, à l’intérieur d’un domaine d’utilisation défini, à obtenir des résultats directement proportionnels à la concentration de l’analyte dans la matrice.

5. Die Empfindlichkeit

La sensibilité d’une méthode est la capacité à distinguer deux concentrations très voisines d’un analyte. Elle est évaluée généralement au travers de la LoD, de la LoQ et de la pente de de la courbe d’étalonnage.

6. Die Nachweisgrenze (LoD) und die Bestimmungsgrenze (LoQ)

Le « zéro » en chimie analytique n’existe pas ! De manière générale, la  limite de détection LoD et la limite de quantification sont souvent estimée sapproximativement à partir du rapport signal/bruit (S/B) d’un analyte mesuré dans la matrice.

7. Die Stabilität

Ce paramètre est apparenté à la stabilité de l’analyte au cours du temps. Evaluer la stabilité permet de vérifier  la conservation des échantillons au cours du temps pour réaliser la méthode.

8. Die Robustheit

C’est la capacité d’une méthode à donner des résultats d’une précision acceptable dans des conditions variables minimes. Elle permet donc d’évaluer la fiabilité d’une méthode analytique dans des conditions d’usage de routine.

9. Die Messunsicherheit

L’incertitude de mesure peut être définie de plusieurs manières…que nous vous proposons de découvrir dans un article spécifique à paraître dans une de nos prochaines Newsletters ! What about calibration ? Le terme « calibration » n’existe pas dans la langue française, c’est un anglicisme. « Etalonnage » or « calibrage » are the right words in French to be used to talk about calibration. COMMENT ? De nombreux référentiels disponibles abordent la validation de méthodes analytiques et les critères d’acceptation, entre autres : ISO 17025:2017 : Exigences générales concernant la compétence des laboratoires d’étalonnages et d’essais ISO 5725-1:1994 : Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 1: Principes généraux et définitions ISO 5725-2:1994 : Exactitude (justesse et fidélité) des résultats et méthodes de mesure — Partie 2: Méthode de base pour la détermination de la répétabilité et de la reproductibilité d’une méthode de mesure normalisée FDA Guidance for Industry (July 2015): Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics ICH Q2 (R1) : Validation of analtycal procedures : text and methodology NF T90-210 Mai 2009 : Qualité de l’eau – Protocole d’évaluation initiale des performances d’une méthode dans un laboratoire NF V03-110 Mai 2010 : Analyse des produits agricoles et alimentaires – Protocole de caractérisation en vue de la validation d’une méthode d’analyse quantitative par construction du profil d’exactitude Guide Citac / Eurachem : Guide pour la Qualité en Chimie analytique Guide de validation analytique : rapport d’une commission SFSTP – I : méthodologie. En fonction de vos besoins, FILAB vous apporte son expertise et vous accompagne pour tous vos projets de validations de méthodes analytiques (validation de méthode analytique complète ou validation de méthode analytique simple). Pour tout complément d’informations, contactez notre expert à l’adresse : contact@filab.fr Le saviez-vous ? Les matrices cosmétiques sont bien souvent complexes à analyser, de par le nombre d’ingrédients qui les composent (parfois 20, 40 ingrédients pour certains produits…). Ainsi, lors de l’analyse d’un produit cosmétique, cela a pour conséquence d’importants effets de matrice qui engendrent en analytique des interférences potentielles, et donc des faux positifs.  La norme ISO 12787:2011 définit des critères de validation de méthodes analytiques chromatographiques pour les produits cosmétiques.