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5200 m² Laborfläche
Über 99 % der Leistungen werden intern erbracht
Akkreditiertes Labor
COFRAC ISO 17025
Ihr Bedarf: Proteine nach der Lowry-Methode analysieren
Die Lowry-Methode ist eine Technik zur Proteinbestimmung mittels Farbmessung (über Absorbanz/Spektrophotometrie), sie beruht auf einer Reihe chemischer Reaktionen, die zur Bildung eines farbigen Komplexes führen.
Quantifizieren Sie Ihre Proteine mit der Lowry-Methode
In den Bereichen pharmazeutischen, kosmetischen, chemischen oder natürlichen Inhaltsstoffen, ist die Proteinquantifizierung ein entscheidender Schritt, um die Qualität, die Konformität und die Leistung der Endprodukte.
Die Lowry-Methode bietet einen zuverlässigen und empfindlichen Ansatz zur Proteinbestimmung, basierend auf einer kolorimetrischen Reaktion, die es ermöglicht, die Proteinkonzentration in Ihren Proben präzise zu messen – selbst bei geringem Gehalt.
Was ist die Lowry-Methode?
Die Lowry-Methode beruht auf der Reduktion von Cu²⁺-Ionen durch Peptidbindungen (und aromatische Aminosäuren) in alkalischem Milieu, gefolgt von der Reaktion der Produkte dieser Reduktion mit dem „Folin-Ciocalteu-Reagenz“, wodurch ein farbiger Komplex entsteht, dessen Absorbanz gemessen wird.
Sie ermöglicht die Bestimmung der Proteinkonzentration einer Probe anhand eines Proteinstandards, mit hoher Empfindlichkeit (µg/mL) und breiter Anwendbarkeit.
Unsere Leistungen rund um Proteine
Das Labor FILAB bietet ein breites Spektrum an analytischen Leistungen rund um Proteine. Diese spezialisierten Dienstleistungen richten sich an Industrieunternehmen, die ihre interessanten Proteine im Detail charakterisieren möchten.
Analyse der Reinheit, der Stabilität oder des Abbaus von Proteinen
FILAB führt Proteinanalysen nach der Lowry-Methode durch
Warum FILAB für die Proteinanalyse nach der Lowry-Methode wählen?
Im Labor FILAB stellen wir Industrieunternehmen aus der Pharma-, Kosmetik- und Chemiebranche eine umfassende analytische Expertise für die Quantifizierung und Charakterisierung von Proteinenzur Verfügung. FILAB bietet maßgeschneiderte Lösungen für die Proteinanalytik: Gehaltsbestimmung, Identifizierung von Kontaminanten, strukturelle Charakterisierung, gestützt durch modernste Technologien (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
Was sind die wichtigsten Vorteile der Lowry-Methode?
Eine sehr hohe Empfindlichkeit
Die Lowry-Methode ermöglicht die Quantifizierung von Proteinen bei mittleren Konzentrationen, was sie für zahlreiche Produktionsprozesse oder Formulierungen nützlich macht.
Eine breite Kompatibilität mit komplexen Formulierungen
Die Lowry-Methode zeichnet sich durch ihre große Anwendungsvielfalt aus. Sie lässt sich auf eine breite Palette von Matrizes anwenden, wie sie in industriellen oder Forschungsumgebungen vorkommen:
- Pufferlösungen: Die Methode passt sich problemlos an wässrige oder leicht salzhaltige Medien an, die bei Reinigungs- oder Formulierungsschritten verwendet werden.
- Endformulierungen: Ob Cremes, Gele, Injektionslösungen oder Nahrungsergänzungsmittel – die Methode kann angepasst werden, um Matrixinterferenzen (Tenside, Konservierungsstoffe, Zusatzstoffe usw.) zu neutralisieren.
Dank dieser breiten Kompatibilität lässt sich die Lowry-Methode problemlos in Ihre Entwicklungs-, Qualitätskontroll- oder Prozessüberwachungsprotokolle integrieren und gewährleistet dabei die Zuverlässigkeit der Proteinbestimmung – unabhängig von den Anforderungen Ihres Produkts.
Eine gute Reproduzierbarkeit und Signalstabilität
Der durch die CBQCA-Protein-Reaktion gebildete fluoreszierende Komplex ist zeitstabil und gewährleistet eine gute Reproduzierbarkeit der Messungen sowie eine erhöhte Zuverlässigkeit bei Probenvergleichen.
Eine Ergänzung zu anderen Methoden
Die Lowry-Methode lässt sich problemlos in eine analytische Multitechnik-Strategie integrieren:
Als Ergänzung zum BCA für unterschiedliche Konzentrationsbereiche,
Zur Unterstützung von HPLC oder LC-MS/MS für eine feine Quantifizierung vor der Charakterisierung,
Im Rahmen von Methodenentwicklung und -validierung gemäß ICH Q2 (R2).
FAQ
Was ist das Grundprinzip der Lowry-Methode?
Die Lowry-Methode ist eine Technik zur kolorimetrischen Bestimmung von Proteinen in Lösung. Sie beruht auf einer Doppelreaktion:
- der Biuret-Reaktion, bei der Peptidbindungen die Ionen in alkalischem Milieu reduzieren.
- der Reduktion der Folin-Ciocalteu-Reagenzien (vor allem Molybdän- und Wolframionen) durch die Cu+-Ionen und die phenolischen Gruppen (Aminosäuren Tyrosin und Tryptophan) der Proteine.
Diese Reduktion erzeugt eine intensive blaue Farbe, deren Absorbanz spektrophotometrisch gemessen wird.
Welcher typische Empfindlichkeitsbereich hat die Lowry-Methode?
Die Lowry-Methode gilt im Vergleich zur einfachen Biuret-Methode als sehr empfindlich. Ihr Quantifizierungsbereich liegt in der Regel zwischen 0,005 und 1 mg/mL (also 5 bis 1000 µg/mL).
In welchen biopharmazeutischen Kontexten wird die Lowry-Methode bevorzugt?
Sie wird häufig in den Phasen der Forschung und Entwicklung (F&E) oder in Prozesskontrollen eingesetzt, wenn Empfindlichkeit erforderlich ist und Störfaktoren beherrscht werden können oder nicht vorhanden sind, insbesondere für:
Die Überwachung der Proteinreinigung nach bestimmten Chromatographieschritten.
Die Bestimmung der Konzentration reiner Protein-Stammlösungen.
Die Quantifizierung von Proteinen in subzellulären Fraktionen nach der Lyse.
Ist die Lowry-Methode für die Methodenvalidierung gemäß ICH Q2(R2) geeignet?
Ja, die Lowry-Methode kann einer vollständigen Methodenvalidierung gemäß den ICH-Q2(R2)-Leitlinien unterzogen werden (Spezifität, Richtigkeit, Präzision, Nachweis- und Quantifizierungsgrenzen, Linearität usw.), sofern Interferenzen beherrscht werden und die analytischen Leistungsmerkmale (insbesondere Präzision und Richtigkeit) den regulatorischen Anforderungen des Zielprodukts entsprechen.
Warum die Lowry-Methode zur Proteinquantifizierung verwenden?
Diese Methode ist bekannt für ihre hohe Empfindlichkeit, ihre Reproduzierbarkeit und ihre Anpassungsfähigkeit an unterschiedliche Matrizes.
Sie ermöglicht die Messung des Proteingehalts in Proben, bei denen andere Methoden (wie Bradford oder UV 280 nm) weniger geeignet wären, insbesondere wenn hohe Genauigkeit erforderlich ist.
Was sind die Grenzen der Lowry-Methode?
Bestimmte Substanzen können die Farbreaktion beeinflussen, insbesondere:
Reduktionsmittel,
Detergenzien oder Tenside,
hohe Konzentrationen von Salzen oder alkalischen Puffern.
Diese Effekte können jedoch durch eine geeignete Probenvorbereitung korrigiert oder durch die Entwicklung einer an die untersuchte Matrix angepassten Methode behoben werden.
Die Vorteile von filab
Ein hochqualifiziertes Team
Eine schnelle Reaktionszeit und Bearbeitung von Anfragen
Ein COFRAC-akkreditiertes Labor nach ISO 17025
(Geltungsbereiche verfügbar auf www.cofrac.com - Akkreditierungsnr.: 1-1793)
Ein vollständiger analytischer Gerätepark auf 5.200 m²
Eine maßgeschneiderte Betreuung
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