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Su necesidad: analizar proteínas según el método Lowry
El método Lowry es una técnica de cuantificación de proteínas por colorimetría (por absorbancia/espectrofotometría), y se basa en una serie de reacciones químicas que conducen a la formación de un complejo coloreado.
Cuantifique sus proteínas con el método Lowry
En los ámbitos farmacéutico, cosmético, químico o de ingredientes naturales, la cuantificación de proteínas constituye una etapa clave para garantizar la calidad, la conformidad y la rendimiento de los productos finales.
El método Lowry ofrece un enfoque fiable y sensible para la cuantificación de proteínas, basada en una reacción colorimétrica que permite medir con precisión la concentración proteica en sus muestras, incluso a baja concentración.
¿Qué es el método Lowry?
El método Lowry se basa en la reducción de los iones Cu²⁺ por los enlaces peptídicos (y los aminoácidos aromáticos) en medio alcalino, seguida de la reacción de los productos de esta reducción con el «reactivo de Folin-Ciocalteu», dando lugar a un complejo coloreado que mide la absorbancia.
Permite determinar la concentración proteica de una muestra a partir de un patrón proteico, con buena sensibilidad ( µg/mL ) y una amplia aplicabilidad.
Nuestros servicios sobre proteínas
El laboratorio FILAB ofrece una amplia gama de servicios analíticos en torno a las proteínas. Estos servicios especializados están dirigidos a los industriales que desean caracterizar en detalle sus proteínas de interés.
Análisis de la pureza, de la estabilidad o de la degradación de proteínas
FILAB realiza análisis de proteínas según el método Lowry
¿Por qué elegir FILAB para el análisis de proteínas según el método Lowry?
En el laboratorio FILAB, ponemos a disposición de los industriales de la industria farmacéutica, cosmética y química una experiencia analítica completa para la cuantificación y caracterización de proteínas. FILAB ofrece soluciones a medida para el análisis de proteínas: dosificación, identificación de contaminantes y caracterización estructural, respaldadas por tecnologías de vanguardia (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
¿Cuáles son las principales ventajas del método Lowry?
Una sensibilidad muy alta
El método Lowry permite la cuantificación de proteínas a concentraciones intermedias, lo que lo hace útil para numerosos procesos de producción o formulaciones.
Una amplia compatibilidad con formulaciones complejas
La método Lowry se distingue por su gran versatilidad de aplicación. Puede aplicarse a una amplia gama de matrices presentes en entornos industriales o de investigación:
- Soluciones tampón: el método se adapta fácilmente a medios acuosos o ligeramente salinos utilizados durante las etapas de purificación o formulación.
- Formulaciones finales: ya se trate de cremas, geles, soluciones inyectables o complementos, el método puede ajustarse para neutralizar las interferencias de la matriz (agentes tensioactivos, conservantes, aditivos…).
Gracias a esta amplia compatibilidad, el método Lowry se integra fácilmente en sus protocolos de desarrollo, control de calidad o seguimiento de proceso, garantizando al mismo tiempo la fiabilidad de la cuantificación de proteínas, sean cuales sean las exigencias de su producto.
Reproducibilidad y estabilidad de la señal
El complejo fluorescente formado por la reacción CBQCA-proteína es estable en el tiempo, lo que garantiza una buena reproducibilidad de las mediciones y una mayor fiabilidad al comparar muestras.
Complementariedad con otros métodos
El método Lowry se integra fácilmente en una estrategia analítica multitécnica:
Utilizado como complemento del BCA para distintos rangos de concentración,
Como apoyo de la HPLC o de la LC-MS/MS para una cuantificación precisa antes de la caracterización,
En el marco del desarrollo y validación de métodos según ICH Q2 (R2).
FAQ
¿Cuál es el principio básico del método Lowry?
El método de Lowry es una técnica de cuantificación colorimétrica de proteínas en solución. Se basa en una doble reacción:
- La reacción de Biuret, en la que los enlaces peptídicos reducen los iones en medio alcalino.
- La reducción de los reactivos de Folin-Ciocalteu (principalmente los iones molibdénicos y tungstenicos) por los iones Cu+ y los grupos fenólicos (aminoácidos Tirosina y Triptófano) de las proteínas.
Esta reducción produce un color azul intenso cuya absorbancia se mide por espectrofotometría.
¿Cuál es el rango de sensibilidad típico del método Lowry?
El método de Lowry se considera muy sensible en comparación con el método de Biuret simple. Su rango de cuantificación suele situarse entre 0,005 y 1 mg/mL (es decir, de 5 a 1000 µg/mL).
¿En qué contextos biofarmacéuticos se prefiere el método Lowry?
Se utiliza a menudo en las etapas de Investigación y Desarrollo (I+D) o en los controles de proceso, donde se requiere sensibilidad y donde los interferentes pueden gestionarse o estar ausentes, en particular para:
El seguimiento de la purificación de proteínas después de ciertas etapas de cromatografía.
La determinación de la concentración de stocks de proteínas puras.
La cuantificación de proteínas en fracciones subcelulares tras la lisis.
¿Es adecuado el método Lowry para la validación de métodos según ICH Q2(R2)?
Sí, el método de Lowry puede someterse a una validación del método completa según las directrices de la ICH Q2(R2) (especificidad, exactitud, precisión, límites de detección y de cuantificación, linealidad, etc.), siempre que las interferencias estén controladas y que el rendimiento analítico (en particular la precisión y la exactitud) cumpla los requisitos reglamentarios del producto objetivo.
¿Por qué utilizar el método Lowry para la cuantificación de proteínas?
Este método es reconocido por su buena sensibilidad, su reproducibilidad y su capacidad para adaptarse a matrices variadas.
Permite medir el contenido de proteínas en muestras en las que otros métodos (como Bradford o UV 280 nm) serían menos adecuados, especialmente cuando se requiere una gran precisión.
¿Cuáles son los límites del método Lowry?
Algunas sustancias pueden interferir con la reacción colorimétrica, en particular:
los agentes reductores,
los detergentes o agentes tensioactivos,
las altas concentraciones de sales o de tampones alcalinos.
Sin embargo, estos efectos pueden corregirse con una preparación adecuada o mediante el desarrollo de un método específico para la matriz estudiada.
Las ventajas de Filab
Un equipo altamente cualificado
Una gran rapidez de respuesta y de gestión de las solicitudes
Un laboratorio acreditado COFRAC ISO 17025
(Alcances disponibles en www.cofrac.com - N.º de acreditación: 1-1793)
Un parque analítico completo de 5 200 m²
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