Análisis por LC-Orbitrap en laboratorio

El Orbitrap ofrece una mejor resolución y una mayor precisión que los espectrómetros de masas clásicos (tipo cuadrupolo o ion trap). Es especialmente útil para identificar estructuras moleculares complejas, diferenciar isómeros o resolver masas muy próximas en matrices complejas.

Todo tipo de matriz orgánica: polvos, líquidos, polímeros, extractos vegetales, películas finas, soluciones, cosméticos, etc.

Está especialmente adaptada a muestras complejas o multicomponente, incluso en pequeñas cantidades.

Sí, es posible una cuantificación semicuantitativa o relativa, sobre todo para mezclas complejas o en screening. Para dosificaciones reglamentarias precisas, puede combinarse con otros enfoques (LC-MS/MS).

Gracias a su alta resolución, la LC-Orbitrap es ideal para identificar compuestos orgánicos desconocidos o no listados, responsables de olores, coloraciones o defectos visuales. Permite analizar trazas en matrices complejas (cosméticos, polímeros, formulaciones…).

Permite detectar impurezas en estado de traza, incluidas las no dirigidas, a menudo invisibles en LC-MS clásica. 

Esto es útil en las fases de desarrollo farmacéutico, de cualificación de proveedores, o durante cambios de proceso.

El análisis no dirigido con LC-Orbitrap permite proponer una fórmula bruta a partir de una señal y elucidar parcial o totalmente la estructura de un compuesto mediante la fragmentación MS/MS y bases de datos internas o externas.

La LC-Orbitrap es muy adecuada para el análisis de mezclas multicomponente procedentes de plantas, aceites esenciales, polímeros de origen biológico… Permite un perfilado completo y la diferenciación entre lotes o proveedores, incluso en ausencia de patrones.

Sí, especialmente para identificar sustancias migrantes a muy baja concentración (ftalatos, disolventes residuales, aditivos, etc.), en el marco de estudios de compatibilidad o de conformidad normativa (farmacéutica, cosmética, alimentaria).

En primer lugar, la espectrometría de masas por Orbitrap permite el atrapamiento de iones mediante un campo electrostático. Estos iones poseen una frecuencia de oscilación axial variable en función de su relación masa/carga, lo que permite separarlos. 

El Orbitrap está compuesto por un electrodo central y un electrodo externo en forma de cilindro. El electrodo central coaxial al eje interno atrapa los iones en un movimiento orbital y, a continuación, puede generarse un espectro de masas a partir del detector, que convierte la imagen de la corriente inducida de los iones atrapados en un espectro de frecuencia utilizando la transformada de Fourier.

Por consiguiente, la espectrometría de masas Orbitrap ofrece una espectrometría de masas cuantitativa acoplada a la cromatografía en fase líquida (LC-MS) de alta resolución y precisión de masa (HRAM). 

La LC-Orbitrap HRMS combina la cromatografía líquida con un espectrómetro de masas de alta resolución que permite obtener una medida de masa exacta. Está especialmente adaptada a los enfoques no dirigidos, como el cribado de compuestos desconocidos, la identificación de moléculas inesperadas o la caracterización de mezclas complejas. Permite explorar una muestra sin necesidad de conocer de antemano los compuestos buscados.

La LC-MS/MS (triple cuadrupolo) se utiliza principalmente para análisis dirigidos y cuantitativos. Permite buscar y cuantificar con gran sensibilidad moléculas previamente identificadas, gracias al seguimiento de transiciones masa/masa específicas.

Así, la LC-Orbitrap HRMS se prefiere para la identificación, la caracterización molecular y el cribado amplio, mientras que la LC-MS/MS suele elegirse para la cuantificación precisa de compuestos conocidos en estado de trazas.

En el laboratorio FILAB, estos dos enfoques son complementarios: la HRMS Orbitrap permite explorar y caracterizar matrices complejas, mientras que la LC-MS/MS aporta una cuantificación dirigida y sensible de los compuestos buscados.