Analisi delle proteine secondo il metodo CBQCA
La vostra esigenza: analizzare le proteine secondo il metodo CBQCA
Il metodo (CBQCA) (3-(4-Carbossibenzoyl)chinolina-2-carbossaldeide) è una tecnica di dosaggio delle proteine tramite fluorescenza, che offre una sensibilità nettamente superiore ai metodi colorimetrici classici come il BCA o il Bradford.
Quantificate le vostre proteine con un’elevata precisione fluorescente
Nei settori farmaceutico, cosmetico, chimico o degli ingredienti naturali, la quantificazione delle proteine è una fase essenziale per controllare la qualità, la conformità e le prestazioni dei prodotti finiti.
Il metodo CBQCA (3-(4-carboxybenzoyl)quinoline-2-carboxaldehyde) consente una quantificazione sensibile e specifica delle proteine, anche a concentrazioni molto basse, grazie alla rilevazione per fluorescenza.
Che cos’è il metodo CBQCA?
Il metodo CBQCA si basa su una reazione tra il reagente CBQCA e i gruppi amminici primari delle proteine e dei peptidi, formando un complesso fluorescente rilevato mediante spettrofluorimetria.
È particolarmente adatto a campioni a bassa concentrazione proteica o contenenti interferenze ottiche che limitano l’uso dei metodi colorimetrici classici (BCA, Bradford, Lowry).
I nostri servizi sulle proteine
Il laboratorio FILAB propone un’ampia gamma di servizi analitici dedicati alle proteine. Questi servizi specializzati si rivolgono agli industriali che desiderano caratterizzare nel dettaglio le proprie proteine di interesse.
Analisi della purezza, della stabilità o della degradazione delle proteine
FILAB esegue analisi delle proteine secondo il metodo CBQCA
Perché scegliere FILAB per l’analisi delle proteine secondo il metodo CBQCA?
Nel laboratorio FILAB, mettiamo a disposizione degli operatori dei settori farmaceutico, cosmetico e chimico una competenza analitica completa per la quantificazione e la caratterizzazione delle proteine. FILAB propone soluzioni su misura per l’analisi delle proteine: dosaggio, identificazione di contaminanti, caratterizzazione strutturale, supportate da tecnologie all’avanguardia (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
Quali sono i principali vantaggi del metodo CQBCA?
Il metodo CBQCA consente di rilevare quantità estremamente basse di proteine — fino a pochi nanogrammi per millilitro (ng/mL).
Ideale per:
campioni diluiti,
proteine a bassa concentrazione,
matrici a basso contenuto proteico (formulazioni farmaceutiche, estratti naturali, ecc.).
Il reagente CBQCA reagisce solo con i gruppi amminici primari delle proteine e dei peptidi.
Questa selettività riduce notevolmente le interferenze legate ad altri componenti della matrice (detergenti, tamponi, solventi, ecc.).
A differenza di alcuni metodi colorimetrici sensibili alla composizione del mezzo, il CBQCA rimane poco influenzato dagli additivi :
Compatibile con i tamponi ricchi di sali,
Compatibile con i solventi organici,
Compatibile con alcuni detergenti utilizzati nei processi di purificazione.
Il complesso fluorescente formato dalla reazione CBQCA-proteina è stabile nel tempo, garantendo una buona riproducibilità delle misure e una maggiore affidabilità nel confronto tra campioni.
Il metodo richiede poca materia — un vantaggio fondamentale quando si lavora su proteine rare, costose o provenienti da processi con volumi limitati.
Il CBQCA si integra facilmente in una strategia analitica multi-tecnica:
Utilizzato in complemento al BCA per gamme di concentrazione diverse,
A supporto della HPLC o della LC-MS/MS per una quantificazione accurata prima della caratterizzazione,
Nell’ambito dello sviluppo e validazione del metodo secondo ICH Q2 (R2).
FAQ
I team industriali ricorrono a questa analisi in diversi casi:
Problema di produzione: controllo di una resa, rilevazione di una perdita di proteine, monitoraggio di una fase di purificazione.
Controllo di conformità: verifica di una specifica proteica o validazione di un dosaggio.
Ottimizzazione di processo: validazione di un metodo analitico o di un trasferimento tecnologico.
Indagine su un guasto: sospetto di degradazione, interazione o contaminazione.
Esigenza normativa: creazione o aggiornamento di un dossier secondo ICH Q2 (R2).
Il laboratorio FILAB applica il metodo CBQCA su un’ampia varietà di matrici:
Formulazioni farmaceutiche: proteine ricombinanti, vaccini, enzimi, anticorpi monoclonali
Prodotti cosmetici: ingredienti attivi, estratti proteici, formulazioni a base di peptidi
Materie prime chimiche e biotecnologiche
Ingredienti ed estratti naturali: proteine vegetali, estratti enzimatici, idrolizzati
| Metodo | Principio | Sensibilità | Compatibilità con le matrici | Tipo di rilevazione | Applicazioni tipiche |
|---|---|---|---|---|---|
| CBQCA | Reazione fluorescente con ammine primarie | Altissima (ng/mL) | Ampia (tamponi, solventi) | Fluorescenza | Campioni diluiti, elevata sensibilità richiesta |
| BCA | Complesso colorato Cu⁺–BCA | Media-alta (µg/mL) | Buona (detergenti) | Assorbanza | Monitoraggio di produzione, controllo qualità |
| Bradford | Complesso Coomassie–proteine | Media (µg/mL) | Limitata (sensibile agli additivi) | Assorbanza | Dosaggi rapidi, screening iniziale |
I nostri ingegneri selezionano il metodo più pertinente in base alla natura del vostro campione, alla gamma di concentrazione desiderata e all’obiettivo dell’analisi.
I team R&D che esplorano nuove molecole, formulazioni o processi.
I servizi di Controllo Qualità che garantiscono il rilascio dei lotti o la verifica della conformità.
I reparti Produzione/Processo, confrontati con cambi di scala, rese o incidenti di produzione.
I servizi Affari regolatori che devono documentare dossier o rispondere a requisiti normativi.
I responsabili di progetto formulazione/analitica che coordinano il passaggio dall’innovazione all’industrializzazione.