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Laboratoire accrédité
COFRAC ISO 17025
Votre besoin : analyser des protéines selon la méthode Lowry
La méthode Lowry est une technique de dosage des protéines par colorimétrique (par absorbance/spectrophotométrie), elle repose sur une série de réactions chimiques qui aboutissent à la formation d’un complexe coloré.
Quantifiez vos protéines avec la méthode Lowry
Dans les domaines pharmaceutique, cosmétique, chimique ou des ingrédients naturels, la quantification des protéines constitue une étape clé pour garantir la qualité, la conformité et la performance des produits finis.
La méthode Lowry offre une approche fiable et sensible pour le dosage des protéines, basée sur une réaction colorimétrique permettant de mesurer précisément la concentration protéique dans vos échantillons, même à faible teneur.
Qu’est-ce que la méthode Lowry ?
La méthode Lowry repose sur la réduction des ions Cu²⁺ par les liaisons peptidiques (et les acides aminés aromatiques) en milieu alcalin, suivie de la réaction des produits de cette réduction avec le « réactif Folin-Ciocalteu », donnant un complexe coloré mesurant l’absorbance.
Elle permet de déterminer la concentration protéique d’un échantillon à partir d’un étalon protéique, avec une bonne sensibilité ( µg/mL ) et une large applicabilité.
Nos prestations sur protéines
Le laboratoire FILAB propose un large éventail de prestations analytiques autour des protéines. Ces services spécialisés s’adressent aux industriels désireux de caractériser en détail leurs protéines d’intérêt.
Analyse de la pureté, de la stabilité ou de la dégradation de protéines
Analyse de protéines selon la méthode Bradford
FILAB réalise des analyses de protéines selon la méthode Lowry
Pourquoi choisir FILAB pour l'analyse de protéines selon la méthode Lowry ?
Au laboratoire FILAB, nous mettons à disposition des industriels de la pharmaceutique, de la cosmétique, de la chimie une expertise analytique complète pour la quantification et la caractérisation des protéines. FILAB propose des solutions sur mesure pour l’analyse de protéines : dosage, identification de contaminants, caractérisation structurale, appuyées par des technologies de pointe (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
Les principaux intérêts de la méthode Lowry ?
Une sensibilité très élevée
La méthode Lowry permet la quantification de protéines à des concentrations intermédiaires, ce qui la rend utile pour de nombreux procédés de production ou formulations.
Une compatibilité étendue avec les formulations complexes
La méthode Lowry se distingue par sa grande polyvalence d’application. Elle peut être mise en œuvre sur une large gamme de matrices rencontrées dans les environnements industriels ou de recherche :
- Solutions tampons : la méthode s’adapte facilement aux milieux aqueux ou légèrement salins utilisés lors des étapes de purification ou de formulation.
- Formulations finies : qu’il s’agisse de crèmes, gels, solutions injectables ou compléments, la méthode peut être ajustée pour neutraliser les interférences de la matrice (agents tensioactifs, conservateurs, additifs…).
Grâce à cette compatibilité étendue, la méthode Lowry s’intègre aisément dans vos protocoles de développement, de contrôle qualité ou de suivi de procédé, tout en garantissant la fiabilité du dosage protéique quelles que soient les contraintes de votre produit.
Une reproductibilité et une stabilité du signal
Le complexe fluorescent formé par la réaction CBQCA-protéine est stable dans le temps, assurant une bonne reproductibilité des mesures et une fiabilité accrue lors des comparaisons d’échantillons.
Une complémentarité avec d’autres méthodes
La méthode Lowry s’intègre facilement dans une stratégie analytique multi-technique :
Utilisé en complément du BCA pour des gammes de concentration différentes,
En appui de la HPLC ou de la LC-MS/MS pour une quantification fine avant caractérisation,
Dans le cadre de développement et validation de méthode selon ICH Q2 (R2).
FAQ
Quel est le principe de base de la méthode de Lowry ?
La méthode de Lowry est une technique de dosage colorimétrique des protéines en solution. Elle repose sur une double réaction :
- La réaction de Biuret, où les liaisons peptidiques réduisent les ions en milieu alcalin.
- La réduction des réactifs de Folin-Ciocalteu (principalement les ions molybdiques et tungstiques) par les ions Cu+ et les groupements phénoliques (acides aminés Tyrosine et Tryptophane) des protéines.
Cette réduction produit une couleur bleue intense dont l'absorbance est mesurée par spectrophotométrie.
Quelle est la gamme de sensibilité typique de la méthode de Lowry ?
La méthode de Lowry est considérée comme très sensible comparée à la méthode du Biuret simple. Sa plage de quantification se situe généralement entre 0,005 et 1 mg/mL (soit 5 à 1000 µg/mL).
Dans quels contextes biopharmaceutiques la méthode de Lowry est-elle privilégiée ?
Elle est souvent utilisée dans les étapes de Recherche et Développement (R&D) ou les contrôles de procédés où la sensibilité est requise et où les interférents peuvent être gérés ou absents, notamment pour :
Le suivi de purification de protéines après certaines étapes de chromatographie.
Le dosage de la concentration de stocks de protéines pures.
La quantification de protéines dans les fractions subcellulaires après lyse.
La méthode de Lowry est-elle adaptée à la validation de méthode selon l'ICH Q2(R2) ?
Oui, la méthode de Lowry peut être soumise à une validation de méthode complète selon les directives de l'ICH Q2(R2) (spécificité, justesse, fidélité, limites de détection et de quantification, linéarité, etc.), à condition que les interférences soient maîtrisées et que les performances analytiques (notamment la fidélité et la justesse) répondent aux exigences réglementaires du produit ciblé.
Pourquoi utiliser la méthode Lowry pour la quantification des protéines ?
Cette méthode est reconnue pour sa bonne sensibilité, sa reproductibilité et sa capacité à s’adapter à des matrices variées.
Elle permet de mesurer la teneur en protéines dans des échantillons où d’autres méthodes (comme Bradford ou UV 280 nm) seraient moins adaptées, notamment lorsqu’une grande précision est requise.
Quelles sont les limites de la méthode Lowry ?
Certaines substances peuvent interférer avec la réaction colorimétrique, notamment :
les agents réducteurs,
les détergents ou agents tensioactifs,
les fortes concentrations de sels ou de tampons alcalins.
Cependant, ces effets peuvent être corrigés par une préparation adaptée ou par le développement d’une méthode spécifique à la matrice étudiée.
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(Portées disponibles sur www.cofrac.com - N° accréditation : 1-1793)
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