Votre besoin : analyser des protéines selon la méthode Bradford
La méthode Bradford est une technique de dosage des protéines par colorimétrique (par absorbance/spectrophotométrie), elle repose sur une série de réactions chimiques qui aboutissent à la formation d’un complexe coloré.
Quantifiez vos protéines avec la méthode Bradford
Dans les domaines pharmaceutique, cosmétique, chimique ou des ingrédients naturels, la quantification des protéines constitue une étape clé pour garantir la qualité, la conformité et la performance des produits finis.
La méthode Bradford offre une approche rapide et simple pour le dosage des protéines, basée sur une réaction colorimétrique permettant de mesurer précisément la concentration protéique dans vos échantillons, notamment ceux peu contaminés par des interférents.
Qu’est-ce que la méthode Bradford ?
La méthode Bradford est une technique de dosage des protéines par colorimétrie (par absorbance/spectrophotométrie). Elle repose sur la liaison du colorant bleu de Coomassie G-250 aux protéines en milieu acide.
En présence de protéines, le colorant passe de sa forme cationique (rouge-brun, absorption maximale à 465 nm) à sa forme anionique (bleue, absorption maximale à 595 nm). Cette coloration bleue est stable et proportionnelle à la quantité de protéines.
Elle permet de déterminer la concentration protéique d’un échantillon à partir d’un étalon protéique (souvent de la BSA), avec une bonne sensibilité (µg/mL) et une rapidité d’exécution appréciée.
Nos prestations sur protéines
Le laboratoire FILAB propose un large éventail de prestations analytiques autour des protéines. Ces services spécialisés s’adressent aux industriels désireux de caractériser en détail leurs protéines d’intérêt.
Analyse de la pureté, de la stabilité ou de la dégradation de protéines
FILAB réalise des analyses de protéines selon la méthode Bradford
Pourquoi choisir FILAB pour l'analyse de protéines selon la méthode Bradford ?
Au laboratoire FILAB, nous mettons à disposition des industriels de la pharmaceutique, de la cosmétique, de la chimie une expertise analytique complète pour la quantification et la caractérisation des protéines. FILAB propose des solutions sur mesure pour l’analyse de protéines : dosage, identification de contaminants, caractérisation structurale, appuyées par des technologies de pointe (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
Les principaux intérêts de la méthode Bradford ?
C'est l'une des méthodes de dosage les plus rapides et les plus faciles à mettre en œuvre, ne nécessitant pas de chauffage.
Elle est très sensible, permettant la quantification de protéines à des concentrations de l'ordre du µg/mL.
Contrairement à la méthode Lowry, elle est généralement peu affectée par les agents réducteurs, les agents chélatants et certains sucres.
FAQ
Le dosage Bradford fonctionne grâce au colorant bleu de Coomassie. En milieu acide, ce colorant existe principalement sous deux formes :
La forme cationique (rouge-brun) en l'absence de protéine (absorption à 465 nm).
La forme anionique (bleue) en présence de protéine. La liaison du colorant aux acides aminés basiques et aromatiques (comme l'arginine) stabilise cette forme bleue, dont l'absorption maximale est mesurée à 595 nm. L'intensité de la couleur bleue est directement proportionnelle à la concentration de protéines dans l'échantillon.
L'absorbance du complexe protéine-colorant (la forme bleue) est mesurée au spectrophotomètre à 595 nanomètres (nm).
La variabilité protéique signifie que la quantité de couleur bleue produite n'est pas uniquement proportionnelle à la masse totale de protéines, mais aussi à la composition en acides aminés de la protéine. Les protéines riches en acides aminés basiques (Arginine, Lysine, Histidine) et aromatiques (Tyrosine, Tryptophane) induisent une réponse colorée plus intense que les autres. Par conséquent, une quantité égale de deux protéines différentes peut donner deux absorbances différentes, ce qui nécessite d'utiliser un étalon de référence (comme la BSA) pour étalonner les résultats.
