Farmacéutico
En el contexto farmacéutico, las nitrosaminas son contaminantes potencialmente peligrosos y tóxicos. En efecto, pueden formarse durante la fabricación, el almacenamiento o el envasado de productos farmacéuticos. Estos contaminantes pueden representar un riesgo para la salud humana debido a su potencial cancerígeno.
Fue en 2018 cuando se planteó la principal preocupación sobre la presencia de nitrosaminas en ciertos medicamentos. Así, los organismos reguladores han establecido normas estrictas para detectarlas y cuantificarlas en los productos farmacéuticos.
GC-MS/MS o LC-MS/MS (Orbitrap, QTOF): ¿qué técnica se debe adoptar?
En primer lugar, las nitrosaminas específicas que analizar en los productos farmacéuticos dependen del tipo de medicamento y de las condiciones de producción. Las nitrosaminas más controladas habitualmente en el ámbito farmacéutico incluyen:
- N-Nitrosodimetilamina (NDMA)
- N-Nitrosodietilamina (NDEA)
- N-Nitrosometilisopropilamina (NMIPA)
- N-Nitrosodiisopropilamina (NDIPA)
- N-Nitrosometilaminobutírico (NMBA)
- …
A continuación, estas nitrosaminas pueden formarse durante reacciones químicas que implican compuestos nitrosados y aminas. Pueden estar presentes en las materias primas, los disolventes, los reactivos o las condiciones de producción. En cuanto a la detección de estas nitrosaminas en los productos farmacéuticos, es primordial para garantizar la seguridad y la eficacia de los medicamentos.
¿Qué dice la normativa?
El análisis de las nitrosaminas en los productos farmacéuticos debe respetar las directrices regulatorias vigentes, como las emitidas por la FDA en Estados Unidos y la EMA en Europa.
Los fabricantes farmacéuticos están obligados a realizar pruebas periódicas para verificar la presencia de nitrosaminas en sus productos y a tomar medidas correctivas si es necesario para garantizar el cumplimiento de las normas de seguridad.
¿Qué es la GC-MS/MS?
La GC-MS/MS (cromatografía de gases – espectrometría de masas en tándem) es una técnica analítica avanzada que combina la cromatografía de gases (GC) con la espectrometría de masas en tándem (MS/MS). Esta técnica se utiliza para analizar e identificar compuestos químicos en muestras complejas.
Es una técnica potente y versátil que encuentra aplicaciones en diversos ámbitos científicos e industriales. Permite un análisis preciso, sensible y selectivo de compuestos químicos volátiles y semivolátiles, lo que la convierte en una herramienta esencial para la investigación y la cuantificación de sustancias químicas en numerosos campos.
La GC-MS/MS va aún más lejos que la GC/MS al añadir una etapa de fragmentación de los iones antes de su detección. Esta fragmentación adicional de los iones permite obtener información estructural más detallada sobre los compuestos orgánicos presentes en la muestra.
- Mayor selectividad
- Identificación más precisa
- Reducción de interferencias
- Cuantificación más precisa
Un ejemplo de nitrosamina buscada en el sector farmacéutico: la NDMA
El análisis de la N-nitrosodimetilamina (NDMA) puede realizarse con ayuda de varias técnicas analíticas. La elección de la técnica depende de varios factores, en particular de la sensibilidad requerida, el tipo de muestra…
Dos de las técnicas más utilizadas para el análisis de la NDMA son la GC-MS/MS (cromatografía de gases – espectrometría de masas en tándem) y la LC-MS/MS (cromatografía líquida – espectrometría de masas en tándem).
Entonces, ¿qué técnica elegir?
La decisión depende de las necesidades industriales específicas y de las características de la muestra.
Si existen limitaciones en términos de volatilidad, la GC-MS/MS puede ser una opción más adecuada. Si la matriz de la muestra es más compleja o la LC-MS/MS puede ser una opción a considerar.
Las especificaciones que se deben alcanzar también son importantes a la hora de saber qué método y qué técnica adoptar.
En resumen:
La GC-MS/MS (Cromatografía de gases - Espectrometría de masas en tándem):
Ventajas:
La GC-MS/MS se utiliza a menudo para el análisis de compuestos volátiles como la NDMA. Ofrece una separación eficaz de los compuestos, una alta sensibilidad y una alta especificidad gracias a la espectrometría de masas en tándem. Al ser la NDMA volátil, la GC-MS/MS puede ser muy adecuada.
Limitaciones:
Algunas matrices pueden requerir etapas de preparación más complejas. Además, la NDMA puede degradarse durante los procesos de calentamiento de la GC.
La LC-MS/MS (Cromatografía líquida - Espectrometría de masas en tándem):
Ventajas
La LC-MS/MS es versátil y puede utilizarse para analizar una amplia gama de compuestos, incluidos compuestos menos volátiles. Puede ser más adecuada para ciertas matrices, en particular las muestras más complejas.
Limitaciones:
Al ser la NDMA volátil, la LC-MS/MS puede requerir condiciones específicas para el análisis de este compuesto. Además, los disolventes y las condiciones de la LC pueden requerir una optimización para obtener una separación eficaz.
Estas son algunas razones por las que la GC-MS/MS podría preferirse frente a la LC-MS/MS en este contexto:
- La volatilidad de las nitrosaminas: Las nitrosaminas suelen ser volátiles y pueden separarse bien en una columna de GC. La GC está especialmente adaptada al análisis de compuestos volátiles o semivolátiles, mientras que la LC es más adecuada para compuestos menos volátiles.
- Separación eficaz: La GC suele ofrecer una separación más eficaz para compuestos con tiempos de retención cortos y precisos. Esto puede ser ventajoso cuando las nitrosaminas deben separarse de forma nítida y precisa.
- Matrices complejas: Si la muestra farmacéutica contiene matrices complejas, la GC puede ofrecer una mejor separación y una reducción de las interferencias, lo que puede simplificar la detección y la cuantificación de las nitrosaminas.
- Sensibilidad: La GC puede ofrecer una alta sensibilidad, lo que puede ser importante para detectar trazas de nitrosaminas en las muestras farmacéuticas.
- Selectividad: La fragmentación de los iones en la MS/MS de la GC puede proporcionar una mayor selectividad y especificidad en la identificación de las nitrosaminas.
Sin embargo, es importante señalar que la elección entre la GC-MS/MS y la LC-MS/MS depende de varios elementos. En efecto, dependerá de las propiedades específicas de las nitrosaminas analizadas, así como de los recursos instrumentales y de la experiencia disponibles.
Las nitrosaminas también pueden analizarse con éxito utilizando métodos de LC-MS/MS, en particular si son menos volátiles o si la matriz se adapta mejor a la LC.
En definitiva, la decisión debe tomarse en función de las ventajas y desventajas de cada técnica para su aplicación específica.
¿Qué elementos hay que tener en cuenta en el análisis de nitrosaminas por GC-MSMS o LC-MSMS?
- La preparación de la muestra: puede incluir etapas de molienda, extracción o disolución en un disolvente adecuado.
- La extracción: si las nitrosaminas están presentes en cantidades muy bajas, puede ser necesaria una etapa de extracción para concentrar los analitos. La extracción puede realizarse utilizando métodos como la extracción en fase sólida (SPE) o la extracción líquido-líquido (LLE).
- La detección y cuantificación: Para detectar y cuantificar las nitrosaminas, se necesitan métodos analíticos específicos. La espectrometría de masas en tándem (MS/MS) es uno de los métodos de detección más utilizados. La espectrometría de masas en tándem proporciona una alta sensibilidad y permite identificar específicamente las nitrosaminas en función de sus masas moleculares y de sus transiciones de fragmentación. Además, las nitrosaminas pueden estar presentes en niveles muy bajos, por lo que es importante determinar los límites de detección (LOD) y de cuantificación (LOQ) del método analítico para garantizar su sensibilidad.
- La validación del método: Antes de realizar el análisis de rutina, el método debe validarse para garantizar su precisión, sensibilidad, especificidad y robustez. Esto suele implicar estudios de precisión, linealidad, sensibilidad, especificidad y estabilidad.
En conclusión, la elección entre la GC-MS/MS y la LC-MS/MS para el análisis de nitrosaminas depende de varios factores, como las propiedades químicas de las nitrosaminas, las características de la muestra y los objetivos del análisis.
