Su necesidad: analizar proteínas según el método Bradford
El método Bradford es una técnica de dosificación de proteínas por colorimetría (por absorbancia/espectrofotometría), se basa en una serie de reacciones químicas que conducen a la formación de un complejo coloreado.
Cuantifique sus proteínas con el método Bradford
En los sectores farmacéutico, cosmético, químico o de ingredientes naturales, la cuantificación de proteínas constituye una etapa clave para garantizar la calidad, la conformidad y el rendimiento de los productos finales.
El método Bradford ofrece un enfoque rápido y sencillo para la dosificación de proteínas, basado en una reacción colorimétrica que permite medir con precisión la concentración proteica en sus muestras, especialmente en aquellas poco contaminadas por interferentes.
Nuestros servicios sobre proteínas
El laboratorio FILAB ofrece una amplia gama de servicios analíticos en torno a las proteínas. Estos servicios especializados están dirigidos a los industriales que desean caracterizar en detalle sus proteínas de interés.
Análisis de la pureza, de la estabilidad o de la degradación de proteínas
FILAB realiza análisis de proteínas según el método Bradford
¿Por qué elegir FILAB para el análisis de proteínas según el método Bradford?
En el laboratorio FILAB, ponemos a disposición de los industriales de la industria farmacéutica, cosmética y química una experiencia analítica completa para la cuantificación y caracterización de proteínas. FILAB ofrece soluciones a medida para el análisis de proteínas: dosificación, identificación de contaminantes y caracterización estructural, respaldadas por tecnologías de vanguardia (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
¿Qué es el método Bradford?
El método Bradford es una técnica de dosificación de proteínas por colorimetría (por absorbancia/espectrofotometría). Se basa en la unión del colorante azul de Coomassie G-250 a las proteínas en medio ácido.
En presencia de proteínas, el colorante pasa de su forma catiónica (rojo parduzco, absorción máxima a 465 nm) a su forma aniónica (azul, absorción máxima a 595 nm). Esta coloración azul es estable y proporcional a la cantidad de proteínas.
Permite determinar la concentración proteica de una muestra a partir de un patrón proteico (a menudo BSA), con una buena sensibilidad (µg/mL) y una rapidez de ejecución muy apreciada.
¿Cuáles son las principales ventajas del método Bradford?
Es uno de los métodos de dosificación más rápidos y más fáciles de implementar, y no requiere calentamiento.
Es muy sensible, lo que permite cuantificar proteínas a concentraciones del orden de µg/mL.
A diferencia del método Lowry, generalmente se ve poco afectado por los agentes reductores, los agentes quelantes y algunos azúcares.
FAQ
La dosificación Bradford funciona gracias al colorante azul de Coomassie. En medio ácido, este colorante existe principalmente en dos formas:
La forma catiónica (rojo parduzco) en ausencia de proteína (absorción a 465 nm).
La forma aniónica (azul) en presencia de proteína. La unión del colorante a los aminoácidos básicos y aromáticos (como la arginina) estabiliza esta forma azul, cuya absorción máxima se mide a 595 nm. La intensidad del color azul es directamente proporcional a la concentración de proteínas en la muestra.
La absorbancia del complejo proteína-colorante (la forma azul) se mide en el espectrofotómetro a 595 nanómetros (nm).
La variabilidad proteica significa que la cantidad de color azul producida no es únicamente proporcional a la masa total de proteínas, sino también a la composición en aminoácidos de la proteína. Las proteínas ricas en aminoácidos básicos (arginina, lisina, histidina) y aromáticos (tirosina, triptófano) inducen una respuesta de color más intensa que las demás. Por consiguiente, una misma cantidad de dos proteínas diferentes puede dar dos absorbancias distintas, lo que requiere utilizar un patrón de referencia (como la BSA) para calibrar los resultados.
