Pourquoi analyser le polysorbate 20/80 dans les produits biopharmaceutiques par HPLC-MS ?
Le polysorbate 20 et le polysorbate 80 sont des excipients essentiels dans les formulations biopharmaceutiques. Leur rôle principal est d’assurer la stabilité des protéines en réduisant les risques de dénaturation et d’agrégation. Toutefois, leur dégradation, causée par des processus oxydatifs, hydrolytiques ou enzymatiques, peut affecter l’efficacité des médicaments, voire compromettre leur sécurité.
Face à ces enjeux, la méthode HPLC-MS (Chromatographie Liquide Haute Performance couplée à la Spectrométrie de Masse) est une approche rapide et efficace permettant d’analyser et de quantifier précisément les polysorbates 20/80 dans des environnements complexes tels que les solutions protéiques.
Une méthode d'analyse "one-pot" efficace
Le concept de cette méthode qui désigne un processus où toutes les étapes nécessaires d’une analyse ou d’une synthèse sont réalisées dans un même récipient repose sur deux axes : l’hydrolyse des esters d’acides gras du polysorbate et la méthylation rapide des acides gras libres pour améliorer leur détection. Grâce à un processus « one-pot », l’étape de préparation des échantillons est simplifiée, facilitant son intégration dans des environnements de formulation, de développement et de contrôle qualité (QC).
L’approche analytique est la suivante :
- Séparation chromatographique : grâce à l’utilisation d’une colonne HPLC C8 haute performance.
- Détection MS haute sensibilité : pour une identification précise des acides gras méthylés présents dans les polysorbates.
La méthode démontre une sensibilité remarquable, atteignant des niveaux de détection inférieurs au ppm. Elle permet ainsi de quantifier les constituants des polysorbates avec précision, même dans des matrices complexes.
Les avantages de la méthode HPLC-MS
Sensibilité et spécificité accrues
Contrairement aux approches traditionnelles comme l’ELSD ou le CAD, la détection par spectrométrie de masse (MS) offre une meilleure résolution des constituants du polysorbate. Elle permet également une sensibilité accrue, rendant possible la détection de changements subtils dans les concentrations. ainsi que l’identification précise des acides gras constituant les polysorbates (par exemple, laurique pour PS-20 et oléique pour PS-80).
Déploiement et scalabilité
Cette méthode est universellement applicable pour l’analyse des polysorbates 20 et 80, indépendamment du type de produit biopharmaceutique. Elle est facilement déployable dans les laboratoires de contrôle qualité et de développement, garantissant flexibilité et efficacité pour les équipes analytiques.
Polyvalence
Applicabilité universelle pour des matrices complexes (solutions protéiques, produits finis).
Applications concrètes en environnement biopharmaceutique
Développement de formulations : suivi précis des concentrations de polysorbates pour optimiser la stabilité des protéines
Études de stabilité : détection des produits de dégradation pour anticiper les impacts sur l’efficacité du médicament
Contrôle qualité (QC) : surveillance des polysorbates dans les produits finis pour garantir leur conformité
Pour conclure
L’analyse quantitative des polysorbates 20/80 par HPLC-MS est une méthode de référence dans le secteur biopharmaceutique. Grâce à sa sensibilité, sa spécificité et sa capacité à traiter des matrices complexes, elle permet de répondre aux exigences croissantes en matière de qualité et de sécurité des médicaments. Cette technologie constitue un outil incontournable pour les laboratoires d’analyse et de développement dans un contexte de conformité réglementaire (EMA, FDA) et de performance technique.
