Analyse chromatographique en laboratoire

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Vous souhaitez réaliser une analyse chromatographique

Qu'est ce qu'une analyse chromatographique ?

L’analyse chromatographique est une méthode physico-chimique permettant de séparer les différents composants d’un mélange. Elle est basée sur la distribution différentielle des substances entre deux phases : une phase stationnaire et une phase mobile.

Principe de fonctionnement de l'analyse chromatographique

Le principe de la chromatographie repose sur la différence d'affinité des composants du mélange pour la phase stationnaire et la phase mobile. L'échantillon à analyser est d'abord introduit dans le système chromatographique.

  • Phase mobile : c'est un fluide (liquide ou gaz) qui entraîne l'échantillon à travers le système.

  • Phase stationnaire : c'est un matériau fixe (solide ou liquide immobilisé sur un support) qui interagit avec les composants de l'échantillon.

Les différents composants du mélange migrent à des vitesses différentes. Ceux qui ont une forte affinité pour la phase stationnaire sont retenus plus longtemps et se déplacent plus lentement, tandis que ceux qui ont une plus grande affinité pour la phase mobile se déplacent plus rapidement. Cette différence de vitesse de migration permet de les séparer et de les détecter un par un à la sortie du système.

FILAB, expert en analyse chromatographique vous accompagne dans vos analyses

Les différents types d'analyses chromatographiques réalisées à FILAB

Il existe plusieurs types de chromatographie classés selon l'état de la phase mobile :

  • La Chromatographie en phase Gazeuse (GC) : elle s’applique aux molécules volatiles et la phase mobile est un gaz inerte (He, Hydrogène…)
  • La Chromatographie en phase Liquide (LC) : elle s’applique aux molécules hydrosolubles à haut poids moléculaire et la phase mobile est un liquide
  • La Chromatographie Liquide Ionique (CLI) : elle s’applique aux ions (anions ou cations) et la phase mobile est un liquide

Pour encore plus de précision : nos techniques de chromatographie sont couplées à des détecteurs

chromatographie

L’ensemble de ces techniques peuvent être couplées à différents types de détecteur dont les plus courants sont :
Détecteur UV-Visible (HPLC-UV) : il mesure l'absorption de la lumière par le produit à la sortie de la colonne
Détecteur Spectromètre de Masse (GC-MS ou GC-MS/MS ou LC-MS ou LC-MS/MS) : il identifie les molécules par leurs spectres de fragmentation
Détecteur par Ionisation de Flamme (GC-FID) : il mesure les concentrations des espèces organiques dans un courant de gaz.

Notre parc analytique pour l'analyse chromatographique gazeuse

GC-MS

GC-MSMS

GC-FID

Notre parc analytique pour l'analyse chromatographique liquide

UPLC/HPLC

Détecteurs : UV, MS, MS/MS, CAD, RI, ELSD

LC-ORBITRAP

LC-QTOF

GPC

Multi-détection : UV / RI / Viscosimètre / LALS-RALS

Notre parc analytique pour l'analyse chromatographique ionique

CLI ou CLI

FAQ

Pourquoi l'analyse chromatographique est-elle importante ?

La chromatographie est une méthode essentielle en laboratoire pour de nombreuses raisons :

  • Analyse qualitative : Elle permet d'identifier la nature des substances présentes dans un échantillon.

  • Analyse quantitative : Elle permet de déterminer la quantité de chaque substance dans le mélange.

  • Purification : Elle peut être utilisée pour isoler un composé spécifique d'un mélange complexe.

Cette technique est cruciale dans des domaines comme le contrôle qualité des médicaments.

Quels sont les éléments clés d'un système chromatographique ?

Un système de chromatographie standard se compose de :

  • Un injecteur : pour introduire l'échantillon dans le système.

  • Une colonne : qui contient la phase stationnaire et où la séparation a lieu.

  • Un four (en CPG) ou une pompe (en CLHP) : pour contrôler la température ou le débit de la phase mobile.

  • Un détecteur : qui mesure les composés à la sortie de la colonne.

  • Un système d'acquisition de données : pour enregistrer et analyser le signal du détecteur, produisant un chromatogramme.

Qu'est-ce qu'un chromatogramme ?

Un chromatogramme est le résultat graphique d'une analyse chromatographique. Il représente le signal du détecteur en fonction du temps. Chaque pic sur le chromatogramme correspond à un composé séparé et identifié. La position du pic (temps de rétention) et son aire sont des informations cruciales pour l'analyse qualitative et quantitative.

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Thomas ROUSSEAU Directeur Scientifique et Technique
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