Ihr Bedarf: Proteine nach der Bradford-Methode analysieren
Die Bradford-Methode ist eine Technik zur Proteinbestimmung mittels Kolorimetrie (über Absorption/Spektrophotometrie), sie beruht auf einer Reihe chemischer Reaktionen, die zur Bildung eines farbigen Komplexes führen.
Quantifizieren Sie Ihre Proteine mit der Bradford-Methode
In den Bereichen Pharma, Kosmetik, Chemie oder natürliche Inhaltsstoffeist die Proteinquantifizierung ein entscheidender Schritt, um die Qualität, Konformität und Leistung der Endprodukte zu gewährleisten.
Die Bradford-Methode bietet einen schnellen und einfachen Ansatz zur Proteinbestimmung, basierend auf einer kolorimetrischen Reaktion, die es ermöglicht, die Proteinkonzentration präzise zu messen in Ihren Proben, insbesondere in solchen mit geringen Störstoffgehalten.
Unsere Leistungen rund um Proteine
Das Labor FILAB bietet ein breites Spektrum an analytischen Leistungen rund um Proteine. Diese spezialisierten Dienstleistungen richten sich an Industrieunternehmen, die ihre interessanten Proteine im Detail charakterisieren möchten.
Analyse der Reinheit, der Stabilität oder des Abbaus von Proteinen
FILAB führt Proteinanalysen nach der Bradford-Methode durch
Warum FILAB für die Proteinanalyse nach der Bradford-Methode wählen?
Im Labor FILAB stellen wir Industrieunternehmen aus der Pharma-, Kosmetik- und Chemiebranche eine umfassende analytische Expertise für die Quantifizierung und Charakterisierung von Proteinenzur Verfügung. FILAB bietet maßgeschneiderte Lösungen für die Proteinanalytik: Gehaltsbestimmung, Identifizierung von Kontaminanten, strukturelle Charakterisierung, gestützt durch modernste Technologien (LC-MSMS, HPLC, UPLC-UV…).
Was ist die Bradford-Methode?
Die Bradford-Methode ist eine Technik zur Proteinbestimmung mittels Kolorimetrie (über Absorbanz/Spektrophotometrie). Sie beruht auf der Bindung des Farbstoffs Coomassie-Brillantblau G-250 an Proteine in saurem Milieu.
In Gegenwart von Proteinen geht der Farbstoff von seiner kationischen Form (rotbraun, maximale Absorption bei 465 nm) in seine anionische Form (blau, maximale Absorption bei 595 nm) über. Diese blaue Färbung ist stabil und proportional zur Proteinmenge.
Sie ermöglicht die Bestimmung der Proteinkonzentration einer Probe anhand eines Proteinstandards (oft BSA), mit einer hohen Empfindlichkeit (µg/mL) und einer schnellen Durchführung, die geschätzt wird.
Was sind die wichtigsten Vorteile der Bradford-Methode?
Es handelt sich um eine der schnellsten und am einfachsten anzuwendenden Bestimmungsmethoden, die keine Erwärmung erfordert.
Sie ist sehr empfindlich und ermöglicht die Quantifizierung von Proteinen bei Konzentrationen im Bereich von µg/mL.
Im Gegensatz zur Lowry-Methode wird sie im Allgemeinen nur wenig durch Reduktionsmittel, Chelatbildner und bestimmte Zucker beeinflusst.
FAQ
Die Bradford-Bestimmung funktioniert mithilfe des Farbstoffs Coomassie-Brillantblau. In saurem Milieu liegt dieser Farbstoff hauptsächlich in zwei Formen vor:
Die kationische Form (rotbraun) in Abwesenheit von Protein (Absorption bei 465 nm).
Die anionische Form (blau) in Gegenwart von Protein. Die Bindung des Farbstoffs an basische und aromatische Aminosäuren (wie Arginin) stabilisiert diese blaue Form, deren maximale Absorption bei 595 nm gemessen wird. Die Intensität der blauen Farbe ist direkt proportional zur Proteinkonzentration in der Probe.
Die Absorbanz des Protein-Farbstoff-Komplexes (der blauen Form) wird mit dem Spektrophotometer bei 595 Nanometern (nm) gemessen.
Die Proteinvariabilität bedeutet, dass die Menge des erzeugten blauen Farbstoffs nicht nur proportional zur Gesamtproteinmasse ist, sondern auch von der Aminosäurezusammensetzung des Proteins abhängt. Proteine, die reich an basischen Aminosäuren (Arginin, Lysin, Histidin) und aromatischen Aminosäuren (Tyrosin, Tryptophan) sind, erzeugen eine intensivere Farbreaktion als andere. Folglich kann die gleiche Menge zweier verschiedener Proteine zwei unterschiedliche Absorbanzwerte ergeben, weshalb ein Referenzstandard (wie BSA) verwendet werden muss, um die Ergebnisse zu kalibrieren.
